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细胞凋亡是一个细胞信号“自毁”,为维持内环境稳定而启动的程序性死亡的过程。当细胞被破坏或不再被需要时,它们就会发生凋亡或程序性细胞死亡,这是胚胎发育和组织稳态期间发生的一种正常生理过程。细胞凋亡控制受损细胞的有序死亡,而坏死是组织损伤的结果,导致受损细胞和周围细胞的损失。
细胞凋亡过程
凋亡过程,具有一定的形态学特征。包括质膜的改变(如膜对称性和附着能力的丧失)、细胞质和细胞核的浓缩、蛋白质裂解和DNA核内小体裂解。在这一过程的最后阶段,死亡的细胞分裂成凋亡小体,并且接着被吞噬细胞清除,而对周围细胞没有造成明显的炎症性损伤。
然而,一些细胞类型并不表现出凋亡的属性特征。在这种情况下,可能需要对凋亡的多个方面进行分析,以确定细胞死亡的机制。
为了支持这一研究需求,BD生物科学公司提供了全方位的凋亡检测工具和技术,用于检测凋亡过程不同阶段的指标。BD Biosciences工具使用多种方法,包括流式细胞术、生物成像和 显微镜 检查(用于活细胞和固定细胞分析)以及 ELISA、IHC、蛋白免疫印迹 和荧光分光光度法。
通过细胞制备类型检测凋亡细胞或死亡细胞(存活率)的方法。
用于检测不同细胞或组织类型细胞凋亡的方法
Annexin V—细胞凋亡信号传导的关键蛋白
质膜改变是细胞凋亡过程的特征之一。细胞凋亡可以通过磷脂酰丝氨酸(PS)的存在来检测,PS通常位于质膜的细胞质表面。在细胞凋亡过程中,PS转位到质膜的外叶,当钙存在时,可通过与荧光染料标记的Annexin V结合,通过流式细胞术和细胞成像进行检测。
BD Biosciences提供几种常见形式的Annexin V,如用于紫色激光的FITC、PE、BD Horizon™ BV421和用于紫外激光的BD Horizon™ BUV395。随着这些新形式的加入,可以开发更复杂的检测方法来观察异质性细胞亚群内的细胞凋亡。
由于如果质膜受损,细胞内Annexin V也会暴露,因此通常使用膜不渗透染料(如7-AAD)区分凋亡和死亡细胞,以排除死亡细胞。Annexin V染色的细胞群仅代表凋亡细胞群。
通过Annexin V-BD Horizon™ V450监测射频剂量依赖性细胞凋亡、坏死和细胞死亡。在用靶向金纳米颗粒的低剂量西妥昔单抗处理的胰腺癌细胞系中,通过Annexin V-BD Horizon™ V450检测细胞凋亡、坏死和细胞死亡。随着射频场功率增加,温度升高,观察到细胞凋亡(右下象限)向明显坏死(左上象限)的转变。