多种刺激（如细胞因子治疗），可以影响细胞增殖。细胞增殖可以在多种刺激下发生，比如细胞因子暴露或各种其他进程。
细胞增殖染料
BD生物科学公司提供了BD Horizon™ 紫色增殖染料450（VPD）和BD Horizon™ CFSE，分别采用紫色激光和蓝色激光来检测细胞增殖，这便于使用更大的检测组套（panel）。这使得通过多色流式细胞仪从有限的样本中测定更多的数据，成为可能。
这两种增殖染料，都是非荧光酯化染料。酯基允许染料进入细胞。一旦染料进入细胞内，酯酶将把酯基裂解，将染料转化为荧光产物，并将其困在细胞内。随着每次复制事件的发生，细胞中的染料量减少，导致生成一种特征图。
BD Horizon™细胞增殖染料自由进入一个细胞。一旦进入细胞，染料被非特异性酯酶裂解，释放出荧光分子，并且被困在细胞内。
采用抗CD3e和抗CD28进行刺激的小鼠脾上VPD450浓度及细胞周期动力学。C57 Black/6脾细胞，要么加载不同浓度的BD Horizon™VPD450、DMSO，要么作为未处理的对照物，然后用抗CD3e和抗CD28刺激两天。在收集之前，细胞受到BrdU的脉冲作用，然后采用APC抗BrdU和7-AAD（Cat. No. 552598）进行染色。顶部检测组套（panel）（A-C）显示了APC 抗BrdU和7-AAD的染色。底部检测组套（panel）（D-F）显示了对应的VPD450直方图。对照细胞（Cells-）（检测组套A）和1-μM VPD450-加载细胞群（检测组套C）显示 BrdU+细胞的比例相似，（分别为40.7%和39.8%）。高浓度的染料，会对细胞增殖产生负面影响（数据未显示）。为了确认DMSO（用作VPD450的溶剂）不会导致增殖减少，我们添加了DMSO组（检测组套B）。经DMSO处理的细胞，掺入了BrdU，掺入的比例，与Cell-组和1-μM VPD450-加载细胞群的BrdU比例相似。
采用BrdU测定细胞增殖
BD生物科学公司提供了一系列抗体和试剂盒，用于通过测定溴脱氧尿苷（BrdU）来检测增殖细胞，而BrdU是一种DNA前体胸腺嘧啶的类似物，用于检测新生的DNA合成。
在细胞周期的S阶段（DNA合成），BrdU被掺入到新合成的DNA中，从而可以很容易被抗BrdU特异性抗体检测到。设计用于BrdU检测的BD抗体和试剂盒，在细胞内流式细胞术和免疫组织化学染色法中均可以使用，并且包括BD Horizon™ V450、BD Horizon Brilliant Violet™ 510（BV510）、 PerCP-Cy5.5等格式。
除了DNA增加之外，某些蛋白质的水平也会随着细胞增殖而上升。例如，Ki67是一种在分裂细胞细胞核中表达的抗原。然而，在细胞周期的G0阶段，没有检测到它。Ki67可以与其他增殖标志物（如BrdU和VPD450）结合使用，以增加可信度。这些标记物还可以与细胞表面和其他类型的标记物结合，以获得关于细胞亚群及其信号传导途径方面的额外信息。
小鼠脾细胞的细胞增殖分析
将1µM VPD450加载于CD4+富集的小鼠脾细胞10分钟。然后用抗CD3/CD28刺激细胞，并且在指定时间收集细胞。在收获前约4 - 6小时，在BD GolgiStop™蛋白转运抑制剂存在的情况下，使用PMA/离子霉素刺激细胞。对细胞进行固定和破膜，然后采用IL-2染色，并且在BD® LSR II流式细胞仪上进行分析。
仅供研究使用，不用于诊疗程序。
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