immunoassays란 무엇이며 어떤 용도로 사용됩니까?
Immunoassay(면역분석법)는 cytokines, chemokines, growth factor 및 기타 protein과 같은 분석물 검출 및 정량화를 위해 antigen-antibody chemistry 및 이들의 상호작용을 활용하는 분석 방법입니다. Radio-immunoassay (RIAs) 와 enzyme-linked immunosorbent assay (ELISAs)는 가장 일반적으로 사용되는 Immunoassay입니다. ELISA는 뛰어난 민감성, 특수성 및 정밀도로 인해 면역 분석 분석법의 gold standard로 인정받고 있습니다. Enyzme-linked immunosorbent spot (ELISPOT)은 특정 항체 분비 세포를 분석하기 위한 또 다른 강력한 면역 분석법입니다. 최근에 capture bead–based immunoassay는 다양한 분석물 측정에 민감한 옵션을 제공하고 다른 검사법에 비해 대규모로 multiplex 검사를 할 수 있는 기능을 제공합니다.
BD Biosciences는 cytokine 및 chemokine 정량을 위한 분석 플랫폼을 제공합니다.
- multiplex detection 과 analysis을 위한 BD® CBA solution
- routine ELISA research application을 위한 BD OptEIA™ Kits and Sets
- cytokine 생성 빈도를 측정하기 위한 BD® ELISPOT Assays
Tools and Techniques for Cytokine Quantitation
| Tool/Technology | BD® Cytometric Bead Array (CBA) | ELISA | ELISPOT |
|---|---|---|---|
| Molecules detected | Secreted or intracellular | Secreted | Secreted (in situ) |
| Multiparameter | Yes | No | No |
| Single-cell / cell-subset information | No | No | Frequencies, no subset information |
| Antigen-specific | Yes | Yes | Yes |
| Post-assay viability | Yes | Yes | No |
| Protein quantitation | Yes | Yes | No |
| Instrumentation | Flow cytometer | Spectro-photometer | ELISPOT reader |
Bead-based immunoassays
Bead-based assay는 형광 항체와의 결합을 위해 plate 대신 형광 바코드 비드를 사용하고 유세포 분석 방법을 사용하여 분석하는 것입니다. Bead-based immunoassay를 통해 일반적인 ELISA 검사법을 이용하는 것보다 더 높은 민감도로 multiplex 검출이 가능하기 때문에 연구에 필요한 시간과 sample을 절약할 수 있습니다.
BD® Cytometric Bead Arrays (CBA) 소개
CBA assays는 cytokine, chemokine, growth factor 및 phosphorylated signaling protein을 포함하여 다양한 수용성 및 세포 내 단백질 검출을 위해 형광 항체를 사용하는 bead-based immunoassay입니다.
Array내의 capture bead는 고유환 형광 강도를 가지며 단일 분석물에 특정한 capture antibody 로 coating됩니다. 서로 다른 bead의 조합이 시료 또는 standard 및 reporter molecule (PE)에 결합된 detection antibody 혼합물과 혼합됩니다. 배양 및 세척 후 유세포 분석기에서 sample를 획득합니다.
BD® CBA 솔루션은 유연성을 높이기 위해 관심있는 protein이나 antibody를 추가할 수 있는 능력을 제공한다.
BD® CBA Functional Beads는 특정 요구사항에 대한 관심 대상 antibody 또는 protein을 접합하는데 사용할 수 있습니다. 접합 과정은 ulfo-SMCC chemistry를 이용하며 BD® CBA Functional Bead Conjugation Buffer Kit에 있는 완충제와 함께 일반 실험실 소모품을 사용하여 4시간 미만으로 수행합니다. 이는 기존의 ELISA를BD® CBA Flex Set Assays 포트폴리오와 혼합할 수 있는 bead-based immunoassay로 전환하기 위한 이상적인 플랫폼입니다. 여러 bead 위치를 지정할 수 있기 때문에 새로운 multiplex panel을 만들 수 있으며 단일 반응으로 최대 1,000개의 테스트를 준비할 수 있기 때문에 많은 테스트 간에 일관성을 보장합니다.
BD® CBA 솔루션은 사전 구성된 키트 또는 고유한 요구사항에 맞게 구성 가능한 개방형 형식으로 제공됩니다.
