Apoptosis는 세포 재생을 위해 세포가 자기 스스로 파괴하거나 비정상적인 세포 성장을 제어하도록 신호를 보내는 과정입니다. 세포가 손상되거나 더 이상 필요하지 않으면 apoptosis 또는 programed cell death를 겪는데 이는 배아 발달 및 조직 항상성이 유지되는 동안 발생하는 정상적인 생리학적 과정입니다. Apoptosis는 손상된 세포의 질서 정연한 죽음을 제어하는 반면, necrosis는 손상된 세포와 주변 세포 모두의 손실을 유발하여 조직을 손상시키는 결과를 가져옵니다.
Apoptosis 과정
Apoptosis 과정은 특정 형태학적 특징을 나타내는데 원형질막의 변화 (예: 막 대칭 상실 및 막 부착 상실), 세포질과 핵의 응축, 단백질 절단 및 DNA의 nucleosomal 간 절단이 포함됩니다. 이 과정의 마지막 단계에서 죽어가는 세포는 세포 사멸체(apoptotic bodies)로 쪼개지고, 결과적으로 주변 세포에 대한 심각한 염증성 손상 없이 식세포에 의해 제거됩니다.
그러나 일부 세포 유형은 apoptosis의 특징을 보이지 않습니다. 이러한 경우 apoptosis 메커니즘을 확인하기 위해 세포 죽음의 여러가지 측면에 대한 분석이 필요할 수도 있습니다.
이러한 다양한 요구 사항을 지원하기 위해 BD Biosciences는 apoptosis 과정의 여러 단계에서 지표를 측정할 수 있도록 유세포 분석, 바이오 이미징 및 현미경 (살아있는 세포 및 고정 세포 분석 용) 뿐만 아니라 ELISA, IHC , western blotting 및 분광형광측정법 등의 측정 tools와 기술을 제공합니다.
세포 준비 과정별 apoptosis 또는 dead cells(생존률) 확인 방법
다양한 세포 또는 조직에서 apoptosis를 확인하는 방법
Annexin V-apoptosis 신호전달의 핵심 단백질
원형질막의 변화는 살아있는 세포에서 발견되는 세포 사멸 과정의 특징 중 하나입니다. Apoptosis는 일반적으로 원형질막의 세포질 표면에 위치한 phosphatidylserine(PS) 확인으로 측정하는데, apoptosis가 진행되는 동안 PS는 원형질막의 외부로 이동하며 칼슘이 존재할 때 형광 표지 된 annexin V에 결합하여 유세포 분석 및 세포 이미징에 의해 측정될 수 있습니다.
BD Biosciences는 FITC, PE, violet laser용 BD Horizon ™ BV421 및 UV laser용 BD Horizon ™ BUV395와 같은 다양한 형광이 결합된annexin V를 제공합니다. 다양한 형광이 추가됨에 따라 이질적인 세포 하위집합 내에서 apoptosis를 관찰하기 위한 보다 복잡한 assays를 개발할 수 있습니다.
원형질막이 손상되면 세포 내 annexin V도 노출되기 때문에 7-AAD와 같은 막 불투과성 염료는 사멸한 세포를 제외하기 위해 apoptosis와 사멸한 세포를 구분하는데 사용됩니다. 7-AAD는 사멸한 세포에 염색이 되고, annexin v는 apoptosis 세포에 염색이 되어 apoptosis와 cell death구분하는데 사용됩니다.
무선 주파수 선량(Radio frequency dose)에 따른 apoptosis, necrosis, cell death를 Annexin V-BD Horizon ™ V450 으로 확인. 저농도 cetuximab 표적 금 나노 입자로 처리한 췌장암에서 확인. 무선 주파수 파워가 증가함에 따라 온도가 상승하고 apoptosis(오른쪽 아래 사분면)에서 necrosis(왼쪽 위 사분면)로 이동이 관찰됨.
