細胞増殖には、サイトカイン処理など、数多くの刺激が影響を及ぼします。細胞増殖は、サイトカインへの曝露などの多くの刺激や、その他のさまざまなプロセスに反応して起こります。
Cell proliferation dyes
BD Biosciencesは、紫色レーザーで細胞増殖を検出するBD Horizon™紫色増殖色素450（VPD450）と、青色レーザーで細胞増殖を検出するBD Horizon™ CFSEを取り揃えています。これらの製品ではより大きなパネルが使いやすくなっています。そのため、マルチカラーフローサイトメトリーを用いて、限られたサンプルからより多くのデータを取得することができます。
いずれの増殖色素も非蛍光エステル型色素です。エステル基によって色素は細胞内に侵入することができます。色素が細胞内に侵入すると、エステラーゼはエステル基を切断して、色素を蛍光産物に変換し、細胞内でそれを捕捉します。複製イベントが発生する度に、細胞内の色素量が減少し、特徴的なパターンに至ります。
BD Horizon™細胞増殖色素は自由に細胞内に侵入することができます。細胞内に侵入すると、色素は非特異的エステラーゼによって切断され、蛍光分子を放出します。この蛍光分子が細胞内で捕捉されます。
Concentration of VPD450 and cell-cycle kinetics on mouse spleen stimulated with anti-CD3e and anti-CD28. C57 Black/6 splenocytes were either loaded with varying concentrations of BD Horizon™ VPD450, DMSO, or left as untreated controls, then stimulated with anti-CD3e and anti-CD28 for two days. Cells were pulsed with BrdU prior to harvesting, then stained with APC anti-BrdU and 7-AAD (Cat. No. 552598). The top panels (A–C) illustrate APC antiBrdU and 7-AAD staining. The bottom panels (D–F) illustrate the corresponding VPD450 histograms. The control cells (Cells– ) (Panel A) and the 1-μM VPD450- loaded cell population (Panel C) demonstrated a similar percentage of BrdU+ cells (40.7% and 39.8%, respectively). Higher concentrations of dye can negatively impact cell proliferation (data not shown). To confirm that the DMSO (which is used as a solvent for VPD450) is not responsible for a decrease in proliferation, a DMSO group was included (Panel B). DMSO-treated cells incorporated a similar percentage of BrdU compared to the Cells– group and the 1-μM VPD450-loaded cell populations.
